產(chǎn)品名稱 |
人原代小腸粘膜上皮細(xì)胞 |
商品貨號 |
MZ-4244 |
組織來源 |
正常人小腸組織 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)基 |
建議購買人原代小腸粘膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細(xì)胞描述 |
小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。一般根據(jù)形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化將小腸分為三段,分別為十二指腸,空腸和回腸。 小腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層,由外向內(nèi)依次為:漿膜層,平滑肌層,粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層:靠近粘膜下層的是一層平滑肌,稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織,又稱為固有層。最后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的粘膜。小腸粘膜有縱行和橫行皺襞,并有無數(shù)細(xì)小的指狀突起,稱為絨毛。絨毛的基底處粘膜內(nèi)陷成管狀,稱為利貝屈恩氏隱窩。隱窩基底部的上皮細(xì)胞不斷地進(jìn)行有絲分裂,產(chǎn)生新細(xì)胞。隱窩上皮中還有許多杯狀細(xì)胞,它分泌粘液,起滑潤食物和保護(hù)粘膜的作用。細(xì)胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。 |
細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
主要功能 |
(1) 小腸粘膜上皮細(xì)胞分泌腸液,潤滑腸管,易于食物向下運(yùn)動。 (2) 小腸粘膜上皮皺襞很多,有效擴(kuò)大小腸吸收面積,易于食物營養(yǎng)的吸收。 |
主要病生理變化 |
(1) 腸炎。 (2) 小腸息肉。 (3) 腸癌。 |